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Bioss一站式抗體制備服務-北京博奧森生物技術有限公司
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Bioss一站式抗體制備服務
發表者:北京博奧森生物      發表時間:2020-5-11

Bioss專注于抗體研發生產十九年,擁有專業的抗體研發生產團隊,可為客戶提供包含抗原設計—多肽合成/蛋白表達—動物免疫—抗體純化—抗體標記—免疫學檢測等項目的一站式抗體制備服務。


抗體制備服務內容

Bioss可提供兔、小鼠、大鼠、羊、狗等多種動物種屬的多克隆抗體制備服務(點擊填寫申請表)以及小鼠單克隆抗體制備服務(點擊填寫申請表)。

1、客戶提供抗原,抗原可包含:天然蛋白、重組蛋白、細胞或細胞提取液、病毒或病原體、菌種或菌體蛋白、小分子多肽、化合物;其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶聯載體蛋白。

2、客戶僅提供蛋白名稱、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息,我公司根據客戶的實驗需求設計抗原,合成多肽抗原或表達蛋白抗原,免疫動物制備抗體。


單克隆抗體/多克隆抗體制備服務項目差異

單克隆抗體/多克隆抗體

利用生物體對抗原物質產生免疫應答并產生抗體的機制,選用特定抗原物質對機體持續刺激使其產生大量特異性抗體,之后收集純化得到針對特定抗原的特異性抗體, 這一過程就是抗體制備。 抗體制備主要步驟包括:獲得理想免疫原、免疫動物、分離血清和純化抗體,這樣得到的抗體即稱為多克隆抗體 ;而單克隆抗體是通過經典的雜交瘤細胞技術,在小鼠免疫后,將分泌抗體的B淋巴漿細胞與骨髓瘤細胞融合,使得B淋巴漿細胞獲得永生化。再通過有限稀釋法將融合細胞單克隆化,利用包被相應抗原的96孔板對細胞上清進行篩選,上清中有相應抗體,則呈現陽性結果。將陽性孔所對應的雜交瘤細胞株挑出,即為所獲得的單克隆細胞株。單克隆細胞株可通過體外細胞培養或小鼠腹水的方式擴大生產單克隆抗體。


單克隆抗體/多克隆抗體制備差異

抗體的制備,無論是單抗還是多抗,其前期的動物免疫步驟是完全相同的,差異僅僅在篩選。或者說,單抗是在多抗制備的基礎上,進一步篩選并穩定表達特異單克隆細胞株的結果。當抗原免疫動物后,在淋巴結和脾等淋巴器官內通過一系列抗原處理和遞呈,促使B淋巴漿母細胞 (Plasmablasts, PBs)分化成熟,在轉錄水平成為分泌特異抗體的B淋巴漿細胞 (Plasma cells, PCs),大量不同的漿細胞會分泌不同的針對抗原的抗體。由此,可以說每一個B漿細胞都成為一株單克隆抗體的候選者。 傳統的單克隆抗體制備就是通過將小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞系融合,篩選能夠分泌特異抗體并穩定傳代的融合細胞株而實現的。而多克隆抗體(多抗)的制備就是從血清中分離純化所有的未經篩選的單克隆抗體。從以上過程可以看出,無論是單抗還是多抗制備方法,其針對靶點(抗原)的特異性抗體的產生主要源于被免疫動物自身的漿細胞分化成熟。 不同在于,多克隆抗體猶如許多單克隆抗體的集合,它們有的特異性高,有的特異性低,總體特異性符合正態分布曲線的形式(如下圖),而其特異性的總體表現也應處于統計學正態曲線中位線 (MID)的水平。而單抗制備后續的篩選過程,可去除大部分的非特異抗體,保留幾株特異性較好的單克隆抗體。

單抗與多抗特異性示意圖



單克隆與多克隆抗體差異總結

單克隆抗體

多克隆抗體

制備周期

5-6個月

2-3個月

技術要求

產量

價格

對免疫原要求

較高

特異性

高(抗原親和純化)

識別表位

一個

多個

非特異結合

較少

較多

靈敏度

較高

標準化

易,批間差小

較難,批間差大

穩定性

較好

凝集反應

大多數沒有

沉淀反應

大多數沒有

中和活性

大多數沒有


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